NK细胞全面解决方案

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NK细胞是固有免疫的一部分,介导对病毒,寄生虫,细菌和肿瘤细胞的反应。 通过其表面受体FcγRIIIA (CD16)参与固有免疫和适应性免疫应答。

一、  NK细胞分化和发育、分型  

1、multiple sites for nK-cell development

 
2、Developmental origin of human natural killer (NK) cells
 
3、Developmental origin of murine natural killer (NK) cells in the bone marrow (BM)

 
二、  NK细胞的功能  

1、Natural killer (NK) cells in health and disease NK细胞和疾病的关系

2、NK细胞相关的细胞因子功能

 
3、NK细胞与B细胞、T细胞、DC、巨噬细胞如何作用共同针对肿瘤、病原体
 
4、NK cells and immune responses to tumour cells

 
 
三、  NK细胞的胞内信号通路  

1、NK cell receptor
 
2、NK cell effector signaling pathways
 
3、Co-stimulatory molecules that regulate NK-cell 


四、  NK细胞Workflow  

1、NK细胞分选纯化
 
用途 货号 产品名称 规格
全血分选 130-090-875 StraightFrom™ Whole Blood CD56 MicroBeads human Kit
阳性分选 130-050-401 CD56 MicroBeads, human 2mL
无柱式分选 130-098-185 MACSxpress®Whole Blood NK Cell Isolation Kit human Kit
 
2、NK细胞体外扩增培养
NK细胞活化/扩增试剂盒中,含有负载CD2和CD335(NKp46)抗体的抗生物素MACSiBead TM颗粒,PBMC或分离的NK细胞在该颗粒的存在下可以培养长达20天。

NK细胞刺激扩增结果图

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用途 货号 产品名称 规格
NK细胞刺激扩增 130-094-483 NK Cell Activation/Expansion Kit,human Kit
NK细胞培养基 130-114-429 NK MACS Medium 500mL

3、ADCC抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用
抗体通过与靶细胞表面抗原特异性结合,招募如自然杀伤(Natural killer, NK)细胞等效应细胞杀死靶细胞。NK细胞表面表达FcγRIIIa蛋白,是一种抗体Fc区域的受体,能识别并结合抗体的Fc端,从而使NK细胞结合到靶细胞周围。一旦Fc受体与抗体的Fc区域结合,NK细胞就会释放细胞因子和细胞毒性颗粒,进入靶细胞触发细胞凋亡。

 
 
4、流式多色分型检测
Panel 1:Functional Analysis of Human Natural Killer Cells
指标 荧光 克隆号 目的
Live Dead Aqua n/a 活性
CD3 Apc-Cy7 SP34-2 排除
CD4 Apc-H7 SK3  
CD14 TRI-COLOR(PE-Cy5) TuK4  
CD19 TRI-COLOR(PE-Cy5) SJ25-C1  
CD16 Pacific Blue 3G8 NK细胞
CD56 PE-Cy7 NCAM16.2  
CD107a FITC H4A3 脱粒
IFN-γ BV711 4S.B3 功能
TNF-α BV605 Mab11  
Perforin PE B-D48  
Granzyme B PE CF594 GB11  
CD8 BV785 RPA-T8  
Eomesodermin PERCP eflour 710 Dan11mag 转录因子
CD57 APC HCD57 分化
 
 
Panel 2:Multicolor flow cytometric analysis of NK cells from mouse spleen
激光 指标 荧光素 克隆号
紫激光 CD11b VioBlue REA592
Viobility 405/520 Fixable Dye
蓝激光 CD335 FITC REA815
Anti-KLRG1 PE REA1016
CD3 PE-Vio615 REA606
CD19 PE-Vio615 REA749
Anti-NK1.1 PE-Vio770 PK136
红激光 CD27 APC REA499
CD45 APC-Vio770 REA737
 

5、NK相关的细胞因子检测

 
 
reference :
1:Nicholas D. Huntington, Christian A. J. Vosshenrich and James P. Di Santo (2007) Developmental pathways that generate natural-killer-cell diversity  in mice and humans  NaTURe RevIeWS Immunology  
2: Alex M. , Chao Yang. Monica S.(2008) Functions of natural killer cells NATURE IMMUNOLOGY VOLUME 9  
3: Eric V* Jacques A. Nune (2004) Natural Killer Cell Signaling Pathways SCIENCE VOL 306 26
 
 
  观看相关流式课堂请点击链接:自然杀伤细胞NK和ILC固有免疫细胞 
 

 

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